技术指标

外观:白色无定型冻干粉末;蛋白纯度:≥90%;比活性:≥20U/mg酶粉;过氧化氢酶:≤0.03%;NADH/NADPH oxidase:≤0.01%

酶学性质

来源:微生物;分类:EC 1.7.3.3;分子量:40 kDa(SDS-PAGE);等电点:5.1;Km值:2.1×10-5 M(Urate);抑制剂:Fe3+,Co2+,Cu2+,Mn2+,Zn2+;最适:pH 8.5;最适温度:37℃;pH稳定性5.5-10.0(25℃,16 h);热稳定性60℃以下稳定（pH 8.5,30 min）;稳定性:-25～-15℃静置保存12个月保持;80%以上活性;保护剂:硼酸盐、EDTA及非离子型表面活性剂.

用途:用于尿酸试剂的研发和大量配制。

活性测定方法:Uric acid+O2+2H2O Allantoin+CO2+H2O2尿酸（Uric acid）的量可用分光光度计在290nm下检测。

酶活定义:单位酶活定义为在下述反应条件下，每分钟氧化1μmol尿酸所需的酶量。

试剂准备

酶稀释液：在800 mL双蒸水中溶解3.09 g硼酸，0.37 g EDTA·Na2·2H2O和0.01 g TritonX-100，用NaOH调节pH至8.5，用双蒸水定容至1000 mL。

试剂I：0.01%尿酸母液（称取0.01 g尿酸，用酶稀释液定容至100 mL）。

试剂II：0.001%尿酸溶液（取10 mL试剂I，用酶稀释液定容至100 mL）。

样品：用酶稀释液将酶稀释至0.05-0.10U/mL。

操作步骤

1.将试剂II置于37℃水浴锅预热。

2.向3 mL比色皿中加入2 mL试剂II，0.5 mL双蒸水。加入0.5 mL待测酶液，混匀。

3.37℃反应，用分光光度计在290 nm检测样品1 min内的吸光度变化（ΔAs）。

*用酶稀释液替换酶液，其它步骤相同，记录空白的吸光度变化（ΔAb）ΔA=ΔAs-ΔAb

活力计算

3.0：反应液总体积（mL）；

0.5：酶液体积（mL）；

1.0：光路长度(cm)；

df：稀释倍数；

C：酶浓度(mg/mL)；

12.2：尿酸在290 nm处毫摩尔吸光系数(cm2/μmol)。